冷胁迫是影响力农大田作物产油量的主耍场景挑战模式其一。钙依赖关系性淀粉酶激酶（CDPKs/CPKs）可将钙（Ca²⁺）移动信号转递到上皮细胞并修改密码对苦难反应的重要的设定分子，但其调空工作机制尚不弄清楚。

2025年4月，浙江大学周艳虹教授团队在New Phytologist杂志上发表题为“CPK27 enhances cold tolerance by promoting flavonoid biosynthesis through phosphorylating HY5 in tomato”的研究论文，揭示了CPK27通过磷酸化HY5促进类黄酮生物合成，从而将冷触发的Ca²⁺信号与类黄酮途径相结合，以增强番茄冷耐受性的分子机制。本文为理解冷信号转导提供了重要策略，拜谱生物为该研究提供了磷碱化呈现位点的拜谱生物。

用英文怎么说大标题：CPK27 enhances cold tolerance by promoting flavonoid biosynthesis through phosphorylating HY5 in tomato（New Phytologist IF：8.3）

中文版大标题：CPK27通过磷酸化HY5促进黄酮类化合物的生物合成来增强番茄的耐寒性

玩家方：浙江大学

研发产品：番茄

拜谱打造技艺：磷酸性反应绘制位点检则

研究方案基本思路：

一、探索最后

1、CPK27在超高温胁迫下表达出来调整，最后增強植物体抗冻性

既往不咎深入分析一下是因为，CPK27在冷胁迫先决条件下表达方法出来上浮。为印证这一个结论，这篇中作著安全使用CPK27的3个敲除变异系（cpk27 #2，#6）来进行耐冷性测试测试，挖掘CPK27的转录级别重要大于较组（图1a-b）。在CPK27表达方法出来被可以抑制的常绿植物中，对耐冷性的怎强角色重要减小。进一个步骤的亚内部品牌定位与刺激深入分析一下是因为，冷胁迫加速CPK27向内部核积聚，并怎强其磷碱化级别（图1 f）。天然免疫痕印分析一下进一个步骤声明冷胁迫诱发 CPK27 在核内蛋白质丰度新增、胞内丰度以减少，外源CaCl₂处置可一部分修复cpk27的冷强烈表型，是因为CPK27依耐Ca²⁺卫星信号发挥功用角色。（图1g-k）

图1 CPK27以Ca²⁺依懒方式提高番茄抗冻性

2、CPK27用监测黄大环内酯提炼路经减缓高温问题

转录组测序可是表明，CPK27的过展示差异性性调整黄大环内酯生物体自动转化成相关表观遗传，如CHS、CHI和FLS等，同一时间黄大环内酯代谢转化信号通路差异性性含有。而CPK27突然变化体中等等表观遗传展示降低，系统提示CPK27经过促进会黄大环内酯自动转化成促进茎叶控制常温胁迫造成的被氧化压差（图2a-e）。

图2 RNA-seq定性分析CPK27调空的冷为了响应染色体

3、HY5是CPK27介导的抗寒的信号环路中的要点靶标

为校验 CPK27 与 HY5 的双方帮助，原作者先是在了鲜酵母双交配（Y2H）检测英文，但是否认俩者来源于双方帮助（图3a）。双原子荧光互补性（BiFC）检测英文进一个步骤表示CPK27 与 HY5 在肿瘤细胞结构内产生双方帮助（图 3b）。那么在免疫细胞共积淀等技术性，发现了HY5与CPK27在草本植物身体内来源于双方帮助，且俩者的双方帮助具备有钙化合物（Ca²⁺）依赖关系性（图 3c）。因此，在Co-IP检测英文的球蛋白提现前加入的冷胁迫进行处理，但是界面显示冷胁迫可增强学习HY5与CPK27的双方帮助（图 3d）。

图3 CPK27与HY5互作并磷过酸其关键所在位点

4、CPK27磷酸性反应HY5增进其转录活性氧，使得黄吩噻嗪基因组展现

免疫印迹分析结果发现，冷胁迫处理后CPK27可提高HY5蛋白的磷酸化水平，在体外直接磷酸化 HY5（图 4a-c）。通过磷硝化作用突显位点检测工具，发现HY5蛋白的S23和S57两个潜在磷酸化位点。为验证这些位点的功能，作者通过构建非磷酸化突变体，进行磷酸化水平验证，其中双突变体的磷酸化水平下降更为明显（图 4d）。这些结果表明，CPK27 介导的 HY5 磷酸化依赖于 S23 和 S57 这两个特定位点。

图4 CPK27磷过酸HY5并减弱其相对稳相关性

5、CPK27 在类黄酮生物制品转化成径路中意义于HY5的中上游

终合人类基因展现和产生物工程介绍结杲（图5），CPK27在冷胁迫回应时候中帮助于HY5的中上游，能够 政策调控 HY5 介导的类黄酮生物工程分解成通道影晌草本植物耐冷性。

图5 CPK27意义于HY5上中下游

二、文章标题个人心得体会

与此同时所说，本诗学习表达CPK27磷酸性反应修饰语HY5蛋白质，解锁类黄酮提炼方法，助于抗硫化杂质累积，借以增強耐旱作用。该学习确立了“Ca²⁺-CPK27-HY5-类黄酮”级联调节作用体制（图6），证明CPK27介导的HY5磷酸性反应是接钙无线信号与次生基础代谢防御性的关键所在部分，为看法常绿植物顺境为了响应互联网可以提供了新第一人称。

图6 CPK27-HY5电源模块延长植被承受冷胁迫的措施

三、拜谱个人总结

本研究利用转录组和磷酸化修饰位点检测等技术，揭示了CPK27通过磷酸化 HY5调控类黄酮生物合成途径，从而在寒冷环境下增强番茄耐寒性的机制，对解析植物应对寒冷的复杂分子调控网络具有重要意义。拜谱生物作为一家国内领先的多组学服务公司，可提供完善成熟的蛋白酶酶质组学、修饰语蛋白酶酶质组学、新陈代谢组学、转录组学等两组学新产品技术服务，整合多组学数据进行深入挖掘分析，全面解析机制机理等，助力高分文章发表。欢迎咨询！

参考使用文献资料：Lin R, Zhang W, Tian R, et al. CPK27 enhances cold tolerance by promoting flavonoid biosynthesis through phosphorylating HY5 in tomato. New Phytol. 2025;246(5):2174-2191. doi:10.1111/nph.70134